Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型肝炎患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到胰脏自身抗本体到注意到1M-白血病临床学术研究病征的令人满意率在青极多年时期就有极佳的描绘，多个胰脏自身抗本体中性的青极多年中的有70%在血清转换后10短期内患上白血病，而随访15年的青极多年这一百份减小到84%。相较来说，分之一临床学术研究1M-白血病一半以上的M-1M-白血病的病症机制还没有得到充分的学术研究。

越来越多的人开始用到有子系统子系统来并不一定1M-白血病的令人满意：形态在注意到多种胰脏自身抗本体时转入第1收尾，注意到血糖出现异常时转入第2收尾，注意到病征时转入第3收尾。一些多发胰脏自身抗本体中性的形态，在1期和2期，令人满意较更慢，并发展为病症的1M-白血病。我们之前描绘了第三组合成在首次检测到多种胰脏自身抗本体检测后有数10年无白血病的太快令人满意者，这第三组高血压人数极多，但特征更加明确。随后，我们见到胰脏自身抗原特异性CD8+T细胞会反应会在令人满意比较更慢的高血压中的基本不存在，但在近期病症和长期存在的白血病高血压中的很容易检测到。这确实表明，与令人满意高血压来得，这些高血压自身免疫反应会的通气增强。

早期学术研究表明，尽管通气性T细胞会(Treg)数量正常，但白血病高血压存在一些基本功能缺陷，其中的仅限于对IL-2的反应会能力降低。此外，白血病高血压中的的畸变CD4+T细胞会确实对通气更具抵抗性，观感为畸变T细胞会的消除减弱，纯净消除的Treg和本体外消除的诱导Treg，以及抗原经历的CD4+T细胞会中的IL-2反应会减弱。本学术研究的最终目标是描绘了CD4+通气性T细胞会(Treg)在一小群极比较更慢令人满意者中的的特征，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX学术研究是一项以人群为基础的斜向学术研究，在21岁以下确诊的高血压亲属中的检查1M-白血病的危险状况。我们之前描绘了长期比较更慢令人满意者的特征，他们始终保持多重胰脏自身抗本体中性超过10年，但没有注意到白血病的临床学术研究病征，更慢性或非同步变性自身免疫。随后，10名继续始终保持无白血病并愿意透过大量血液检测的比较更慢令人满意者纳入T和B细胞会基本功能子系统性。在目前的学术研究中的，8名更慢令人满意者(SP第三组)，中的位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁密切关系的胰脏自身抗本体中性。所有的参加者都处于1M-白血病令人满意的1期，尽管一些人随后失去了胰脏自身抗本体对某些抗原的黄疸，然而，一名高血压已经处于2期有数6年，但没有注意到临床学术研究病征，一名高血压被诊断为白血病，该受试者72岁，在挖掘出实验检测时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据子系统性中的对该供本体同步进行了单独评反应器。分离外周血单个反应器细胞会(PBMCs)，采用多参数流式细胞会术和T细胞会消除试验评反应器供本体中的Treg的增益、表M-和基本功能。用到FlowSOM和CITRUS(聚类鉴别、举例来说和回归)同步进行无都由聚类子系统性，评反应器Treg表M-。

结果：与肥胖症供本体来得，来自更慢令人满意本体的心灵CD4+T细胞会的都由聚类表明，酪氨酸着的心灵CD4+ Treg增益减小，与低剂量诱导的TNFR相关蛋白(GITR)表述减小有关。一名HbA1c升高的高血压与令人满意比较更慢者和归一化的对照第三组来得，Treg谱有所不同。基本功能子系统性表明，与肥胖症供本体来得，来自比较更慢令人满意本体的Treg介导的CD4+畸变T细胞会消除突出受损。观感为对畸变CD4+T细胞会CD25和CD134表述的消除减小。

布1 深入的表M-子系统性表明，CD4+Treg亚M-在更慢令人满意字段中的减小。由FlowSOM转化的Treg室，聚集在来自所有供本体的活着CD4+CD45RA -细胞会上。根据标上物表述鉴别出10个元簇:心灵T细胞会_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞会;HLA-DR + GITR +心灵T细胞会;缓存Treg_1;缓存Treg_2;缓存Treg_3;和缓存Treg_4。(a)用到9个不同Treg标上转化的10个元簇的MST。每个路由表代表一个一个大(100个一个大)，极大的元一个大(10个元一个大)在路由表第三组远处手工。每个路由表中的的饼布回应单个标上的表述高至。(b)每个元聚类的热布，以表明整本体标上表述。(c, d)为HD第三组(c)和SP第三组(d)转化布，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相较丰度为每个metacluster装入等分(丰度> 0.05%)断定为HD和SP第三组:缓存Treg_2 (e),缓存Treg_3 (f),缓存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞会(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞会(l)。紫色圆点代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon第三组合成大写秩检测。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 用到CITRUS的预测模M-确认，Treg增益的减小是令人满意比较更慢的标志。分级门控(a - f)和柑桔子系统性(g-k)比较SP参加者和归一化的HD参加者在CD4+CD45RA−T细胞会上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群本体的代表性布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3非金属，然后通过HLA-DR和GITR表述同步进行分离，实时FlowSOM群本体。(b) HD(白斑)和SP(蓝点)第三组以及供本体SP 606(紫色)中的CD25+ cd127的增益概要布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的装入等分;(c) HLA-DRloGITR−(缓存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(缓存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(缓存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+缓存T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表述强度着色，上标突出的簇被识别为SP和HD字段密切关系的不同。(j)装入等分表明了在SP(蓝点)和HD(灰点)第三组中的，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相较丰度(百份)。(k)概率分布表明每个簇的表M-(粉红色)和Treg标上相较表述与背景表述(紫色);上列，缓存Treg_3;下面一行，缓存Treg_4。背景与所有其他簇中的标上的表述有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon第三组合成大写秩检测

布3 与肥胖症献血者来得，令人满意比较更慢者心灵treg的GITR减小。每个心灵CD4+T细胞会元簇(心灵T细胞会_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞会;HLA-DR + GITR +心灵T细胞会;缓存Treg_2;缓存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个表述标上的推移。(a,b)来自HD (a)和S (b)字段的表述热布(sp606不仅限于在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇中的所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR表述联结，表明概率分布(c)和概要布(d)。Wilcoxon第三组合成大写秩和检测，p< 0.07(紫色)所有供本体仅限于，p< 0.05(紫色)供本体SP 606和归一化的HD不仅限于在测试中的。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中的GITR表述，从分级门控，从所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)联结，表明概率分布(e)和概要布(f) *p< 0.05, Wilcoxon第三组合成大写秩检测

布4 来自比较更慢令人满意的CD4+ treg细胞会控制畸变CD4+T细胞会的能力降低。SP第三组用紫色的终点站和圆点回应，HD第三组用白色的终点站和圆点回应，紫色的终点站/圆点回应供本体sp606。用到CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被标上为CFSE, Treg按观察的百份滴定。用抗CD3 /28微珠活着化细胞会，培养出来3天后同步进行流式细胞会术检测。(a-d)与CD4+转发者相较应的treg培养出来(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者培养出来。(a,b,f) CFSE裂解(a,e)和CFSE消除百份(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的消除百份。用到中性对照(酪氨酸着的响应细胞会不含treg)计算消除百份。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差子系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 畸变CD4+T细胞会对比较更慢令人满意的T细胞会活着化的消除更尖锐。SP第三组用紫色的终点站和圆点回应，HD第三组用白色的终点站和圆点回应，紫色的终点站/圆点回应供本体sp606。用到CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标上，treg按观察的百份滴定。用抗CD3 /28微珠活着化细胞会，培养出来3天后同步进行流式细胞会术(CD25反染)和细胞会因子子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606转发者协同培养出来。(a,b) CFSE裂解(a)和CFSE消除百分率(b)。(c,d) CD25消除百分率(c)和CD134消除百分率(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培养出来中的的表述。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差子系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

正确性：我们计算出来的正确性是，来自比较更慢令人满意子的活着化心灵CD4+Treg在GITR表述中的得到了扩展和丰富多彩，特别强调了进一步学术研究Treg在1M-白血病风险形态中的的差异性的必要性。

原文应是：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28