Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者困难重重缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现出来人体内自身抗原到显现出来1同型乳癌临床研究腹泻的实质性率在儿童时期就有很好的描绘出，多个人体内自身抗原阴性的儿童中所有70%在血清转换后10将近患病乳癌，而随访15年的儿童这一人口比例上升到84%。整体而言，占临床研究1同型乳癌一半以上的同型1同型乳癌的中风有助于还未给与充份的研究成果。

更为多的人开始适用已确定系统来定义1同型乳癌的实质性：生物体在显现出来多种人体内自身抗原时进到第1期中所，显现出来血糖异常时进到第2期中所，显现出来腹泻时进到第3期中所。一些多发人体内自身抗原阴性的生物体，在1期和2期，实质性较慢，并持续发展为中风的1同型乳癌。我们先前描绘出了一三组在首次探测到多种人体内自身抗原比对后大概10年无乳癌的以致于慢实质性者，这三组病患人数少，但外观上更为具体。随后，我们断定人体内自身复合物特异性CD8+T酶质加成在实质性较快的病患中所基本不假定，但在近期中风和长期假定的乳癌病患中所很很难探测到。这确实表明，与实质性病患相比之下，这些病患自身免疫加成的缓冲增强。

一时期研究成果表明，尽管缓冲性T酶质(Treg)数量正常，但乳癌病患假定一些特性毛病，其中所包括对IL-2的加成技能下降。此外，乳癌病患中所的振荡CD4+T酶质确实对缓冲颇具抵抗性，乏善可陈为振荡T酶质的选择性逼近，大自然产生的Treg和体外产生的诱发Treg，以及复合物经历的CD4+T酶质中所IL-2加成逼近。本研究成果的目标是描绘出了CD4+缓冲性T酶质(Treg)在一小群以致于较快实质性者中所的外观上，他们的总数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究成果是一项以青年人促使将的中轴研究成果，在21岁以下确诊的病患亲属中所氘查1同型乳癌的凶险因素。我们先前描绘出了长期较快实质性者的外观上，他们保持良好多重人体内自身抗原阴性大约10年，但未显现出来乳癌的临床研究腹泻，慢性或非同步进行性自身免疫。随后，10名之后保持良好无乳癌并主动提供大量体液比对的较快实质性者划入T和B酶质特性研究。在目前的研究成果中所，8名慢实质性者(SP三组)，中所位年岁43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的人体内自身抗原阴性。所有的与会者都受制于1同型乳癌实质性的1期，尽管一些人随后无法控制了人体内自身抗原对某些复合物的阴性加成，然而，一名病患已经受制于2期大概6年，但未显现出来临床研究腹泻，一名病患被诊断为乳癌，该受试者72岁，在采集实验比对时，其HbA1c增大到53 mmol/mol(7%)，在数据研究中所对该NADPH同步进行了单独评氘。分立外周血单个氘酶质(PBMCs)，采用多参数流式酶质奥义和T酶质选择性试验评氘NADPH中所Treg的Hz、表同型和特性。适用FlowSOM和CITRUS(聚类核对、密切相关和复归)同步进行无监督聚类研究，评氘Treg表同型。

结果：与身心健康NADPH相比之下，来自慢实质性体的失忆CD4+T酶质的监督聚类辨识，作用于的失忆CD4+ TregHz上升，与糖皮质激素诱发的TNFR具体酶(GITR)说明上升有关。一名HbA1c增大的病患与实质性较快者和给定的比对三组相比之下，Treg小曲有所并不相同。特性结果表明，与身心健康NADPH相比之下，来自较快实质性体的Treg内源性的CD4+振荡T酶质选择性轻微受损。乏善可陈为对振荡CD4+T酶质CD25和CD134说明的选择性上升。

平面图1 系统地的表同型研究辨识，CD4+Treg亚同型在慢实质性描述符中所上升。由FlowSOM分解成的Treg会议室，聚集在来自所有NADPH的活CD4+CD45RA -酶质上。根据标明物说明核对出10个元簇:失忆T酶质_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;失忆T cell_4;CD49b失忆T酶质;HLA-DR + GITR +失忆T酶质;本站程Treg_1;本站程Treg_2;本站程Treg_3;和本站程Treg_4。(a)适用9个并不相同Treg标明分解成的10个元簇的MST。每个路由器都是一个集群(100个集群)，相当大的元集群(10个元集群)在路由器三组外面上色。每个路由器中所的饼平面图说明单个标明的说明最高级别。(b)每个元聚类的热平面图，以辨识整体标明说明。(c, d)为HD三组(c)和SP三组(d)分解成平面图，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)一般来说金属量为每个metacluster装本站平面图(金属量> 0.05%)确定为HD和SP三组:本站程Treg_2 (e),本站程Treg_3 (f),本站程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +失忆T酶质(h)、失忆T cell_1(i),失忆T cell_2 (j),失忆T cell_3 (k) n d CD49b失忆T酶质(l)。粉红色左上角都是**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 适用CITRUS的预测模同型证实，TregHz的上升是实质性较快的标志。AO门控(a - f)和柑橘研究(g-k)比较SP与会者和给定的HD与会者在CD4+CD45RA−T酶质上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的都是性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR说明同步进行分立，模拟器FlowSOM群体。(b) HD(小点)和SP(白点)三组以及NADPHSP 606(粉红色)中所CD25+ cd127的Hz综合平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的装本站平面图;(c) HLA-DRloGITR−(本站程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(本站程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(本站程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+本站程T cell)。(g - i)柑橘簇锥形由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3说明强度填充，箭头突出的簇被识别为SP和HD描述符两者之间的并不相同。(j)装本站平面图辨识了在SP(白点)和HD(灰点)三组中所，CITRUS失忆Treg_3和Treg_4的一般来说金属量(人口比例)。(k)直方平面图辨识每个簇的表同型(深蓝色)和Treg标明一般来说说明与故事情节说明(深蓝色);上列，本站程Treg_3;下面恰巧，本站程Treg_4。故事情节与所有其他簇中所标明的说明有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

平面图3 与身心健康献血者相比之下，实质性较快者失忆treg的GITR上升。每个失忆CD4+T酶质元簇(失忆T酶质_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;CD49b +失忆T酶质;HLA-DR + GITR +失忆T酶质;本站程Treg_2;本站程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个说明标明的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的说明热平面图(sp606不包括在内)。(c,d)失忆Treg_4元簇中所所有HD(黑色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR说明串联，辨识直方平面图(c)和综合平面图(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(粉红色)所有NADPH包括，p< 0.05(深蓝色)NADPHSP 606和给定的HD不包括在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR说明，从AO门控，从所有HD(黑色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(粉红色)串联，辨识直方平面图(e)和综合平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

平面图4 来自较快实质性的CD4+ treg酶质控制振荡CD4+T酶质的技能下降。SP三组用深蓝色的本站和左上角说明，HD三组用银色的本站和左上角说明，粉红色的本站/左上角说明NADPHsp606。适用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T酶质同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被标明为CFSE, Treg按观察的人口比例高锰酸钾。用抗CD3 /28微珠还原酶质，培养出来3天后同步进行流式酶质奥义探测。(a-d)与CD4+转发者一般来说应的treg培养出来(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者培养出来。(a,b,f) CFSE增生(a,e)和CFSE选择性百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的选择性百分比。适用阴性比对(作用于的号召酶质下同treg)计算选择性百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 振荡CD4+T酶质对较快实质性的T酶质还原的选择性更敏感。SP三组用深蓝色的本站和左上角说明，HD三组用银色的本站和左上角说明，粉红色的本站/左上角说明NADPHsp606。适用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T酶质同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标明，treg按观察的人口比例高锰酸钾。用抗CD3 /28微珠还原酶质，培养出来3天后同步进行流式酶质奥义(CD25反染)和酶质因子研究。HD Treg与HD、SP或sp606转发者主导培养出来。(a,b) CFSE增生(a)和CFSE选择性百分比(b)。(c,d) CD25选择性百分比(c)和CD134选择性百分比(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培养出来中所的说明。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论断：我们得出的论断是，来自较快实质性子的还原失忆CD4+Treg在GITR说明中所给与了适配和丰富，阐释了促使研究成果Treg在1同型乳癌风险生物体中所的异质性的不足之处。

原意中有：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28