Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病高血压进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次再次单单现胰脏自身特异性到再次单单现1型式冠心病针灸病症的实质性率在成年人后期就有很好的所述，多个胰脏自身特异性非典型式的成年人之中有70%在肝细胞转换后10年内患上冠心病，而随访15年的成年人这一百分比减小到84%。来得之下，占针灸1型式冠心病一半以上的型式1型式冠心病的发病机制还没有想得到充分的学术研究。

越来越多的人开始常用分期系统来假定1型式冠心病的实质性：个形体在再次单单现多种胰脏自身特异性时转回第1下一阶段，再次单单现血糖异常时转回第2下一阶段，再次单单现病症时转回第3下一阶段。一些多发胰脏自身特异性非典型式的个形体，在1期和2期，实质性较慢，并工业发展为发病的1型式冠心病。我们以前所述了一两组在首次探测到多种胰脏自身特异性抽样后至少10年无冠心病的以致于慢实质性者，这两组病征人口数少，但外观上非常明确。随后，我们推断单单胰脏自身上皮细胞特异性CD8+T细胞会反应会在实质性快速的病征之中原则上不不存在，但在同类型式发病和长期不存在的冠心病病征之中很容易探测到。这可能证明，与实质性病征来得，这些病征化脓性反应会的闭环提高。

最初学术研究证明，尽管闭环性T细胞会(Treg)量正常，但冠心病病征不存在一些基本功能缺失，其之中包括对IL-2的反应会能够减少。此外，冠心病病征之中的物理现象CD4+T细胞会可能对闭环更加具抵抗性，发挥为物理现象T细胞会的诱导减弱，纯净激发的Treg和形粘液激发的诱导Treg，以及上皮细胞亲身经历的CD4+T细胞会之中IL-2反应会减弱。本学术研究的旨在是所述了CD4+闭环性T细胞会(Treg)在大群以致于快速实质性者之中的外观上，他们的平均成年为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

法则：BOX学术研究是一项以年轻人进一步将的纵向学术研究，在21岁以下确诊的病征家庭成员之中检查1型式冠心病的小心因素。我们以前所述了长期快速实质性者的外观上，他们保持多重胰脏自身特异性非典型式超过10年，但没有再次单单现冠心病的针灸病症，慢性或非展开性化脓性。随后，10名继续保持无冠心病并愿意提供大量血液抽样的快速实质性者纳入T和B细胞会基本功能比对。在目前的学术研究之中，8名慢实质性者(SP两组)，之中位成年43岁(31-72岁)，18 - 32岁相互间的胰脏自身特异性非典型式。所有的与会者都保持稳定1型式冠心病实质性的1期，尽管一些人随后失去了胰脏自身特异性对某些上皮细胞的非典型式反应会，然而，一名病征仍未保持稳定2期至少6年，但没有再次单单现针灸病症，一名病征被诊疗为冠心病，该受试者72岁，在采集试制抽样时，其HbA1c下降到53 mmol/mol(7%)，在数据比对之中对该供形体展开了单独比对报告。分离外周血单个核细胞会(PBMCs)，选用多变量流式细胞会术和T细胞会诱导试制比对报告供形体之中Treg的阈值、表型式和基本功能。常用FlowSOM和CITRUS(聚类深入研究、比如说和回归)展开无统筹聚类比对，比对报告Treg表型式。

结果：与心理健康供形体来得，来自慢实质性形体的心灵CD4+T细胞会的统筹聚类揭示，抑制的心灵CD4+ Treg阈值减小，与利尿剂诱导的TNFR方面蛋白(GITR)表述减小有关。一名HbA1c下降的病征与实质性快速者和匹配的对照两组来得，Treg序有所各不相同。基本功能比对证明，与心理健康供形体来得，来自快速实质性形体的Treg介导的CD4+物理现象T细胞会诱导显著受损。发挥为对物理现象CD4+T细胞会CD25和CD134表述的诱导减小。

绘单单1 了解的表型式比对揭示，CD4+Treg甲型式在慢实质性所述符之中减小。由FlowSOM聚合的Treg会议室，周围在来自所有供形体的活CD4+CD45RA -细胞会上。根据记号物表述深入研究单单10个元簇:心灵T细胞会_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞会;HLA-DR + GITR +心灵T细胞会;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)常用9个各不相同Treg记号聚合的10个元簇的MST。每个结点推选一个空降兵(100个空降兵)，更加大的元空降兵(10个元空降兵)在结点两组附近手绘。每个结点之中的饼绘单单对此单个记号的表述分级。(b)每个元聚类的热绘单单，以揭示整形体记号表述。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)聚合绘单单，以及FlowSOM识别系统的每个元簇的裂口。(e-l)相较核素为每个metacluster筒支等分(核素> 0.05%)确定为HD和SP两组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞会(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞会(l)。黄色边框推选捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩验证。此键适用于绘单单形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘单单2 常用CITRUS的数据比对证实，Treg阈值的减小是实质性快速的标识。分级门控(a - f)和柑橘比对(g-k)来得SP与会者和匹配的HD与会者在CD4+CD45RA−T细胞会上的差异。(a)子代CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l小团形体的推选性绘单单。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表述展开分离，仿真FlowSOM小团形体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)两组以及供形体SP 606(黄色)之中CD25+ cd127的阈值概述绘单单。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的筒支等分;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表述强度着色，记号凸显的簇被识别系统为SP和HD所述符相互间的各不相同。(j)筒支等分揭示了在SP(蓝点)和HD(灰点)两组之中，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相较核素(百分比)。(k)概率分布揭示每个簇的表型式(粉红色)和Treg记号相较表述与背景表述(白色);上列，存储器Treg_3;下面几天后，存储器Treg_4。背景与所有其他簇之中记号的表述有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩验证

绘单单3 与心理健康献血者来得，实质性快速者心灵treg的GITR减小。每个心灵CD4+T细胞会元簇(心灵T细胞会_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞会;HLA-DR + GITR +心灵T细胞会;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个表述记号的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)所述符的表述热绘单单(sp606不包括在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇之中所有HD(黄褐色)、所有SP(白色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR表述联接，揭示概率分布(c)和概述绘单单(d)。Wilcoxon配对符号秩和验证，p< 0.07(黄色)所有供形体包括，p< 0.05(白色)供形体SP 606和匹配的HD不包括在测试之中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之中GITR表述，从分级门控，从所有HD(黄褐色)、所有SP(白色)和SP 606(黄色)联接，揭示概率分布(e)和概述绘单单(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩验证

绘单单4 来自快速实质性的CD4+ treg细胞会控制物理现象CD4+T细胞会的能够减少。SP两组用白色的支线和边框对此，HD两组用黑色的支线和边框对此，黄色的支线/边框对此供形体sp606。常用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会展开分选。CD4+CD25−(转发者)被记号为CFSE, Treg按推论的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞会，培育单单3天内展开流式细胞会术探测。(a-d)与CD4+转发者相较应的treg培育单单(自形体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者培育单单。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE诱导多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱导多于。常用非典型式对照(抑制的作出反应细胞会仅有treg)计算诱导多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重来得测试

绘单单5 物理现象CD4+T细胞会对快速实质性的T细胞会转化的诱导更加引人注目。SP两组用白色的支线和边框对此，HD两组用黑色的支线和边框对此，黄色的支线/边框对此供形体sp606。常用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞会展开分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel记号，treg按推论的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞会，培育单单3天内展开流式细胞会术(CD25反染)和细胞会因子比对。HD Treg与HD、SP或sp606转发者共同完成培育单单。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE诱导前年(b)。(c,d) CD25诱导前年(c)和CD134诱导前年(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培育单单之中的表述。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重来得测试

论断：我们得单单的论断是，来自快速实质性子的转化心灵CD4+Treg在GITR表述之中想得到了扩展和丰富，强调了进一步学术研究Treg在1型式冠心病后果个形体之中的表征的不足之处。

原文单单处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28